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小黑杨WRKY56转录因子耐盐调控机理研究

项目名称:小黑杨WRKY56转录因子耐盐调控机理研究

项目级别:黑龙江省科学院青年创新基金

起止时间:2018.01-2019.06

参加人员:李瑶等

项目介绍:本研究以东北地区广泛种植的小黑杨(小黑14)为植物材料,拟开展下列工作:(1) 盐胁迫下小黑杨WRKY转录因子家族基因表达分析利用RNA-seq高通量测序的方法获得正常生长条件下和盐胁迫条件下小黑杨(根、茎、叶)差异表达基因,从差异表达基因中筛选WRKY转录因子家族基因。(2) PsnWRKY56基因克隆及生物信息学分析利用RT-PCR的方法克隆PsnWRKY56基因全长cDNA序列,利用生物信息学软件对该基因及编码蛋白序列进行生物信息学分析。(3) 逆境胁迫下PsnWRKY56基因表达分析利用Real-time PCR的方法对正常生长条件下和干旱、低温、盐胁迫条件下小黑杨叶片中PsnWRKY56基因表达情况进行分析。(4) PsnWRKY56基因过量表达对拟南芥耐盐性影响的研究利用蘸花法将PsnWRKY56基因导入拟南芥中,经过kan抗性筛选和分子检测,获得T3代转PsnWRKY56基因拟南芥阳性植株。对正常生长条件下和盐胁迫条件下转基因植株和非转基因植株的株高、鲜重、根长、POD活性、SOD活性、MDA含量、脯氨酸含量进行测定,以确定PsnWRKY56基因过量表达对拟南芥耐盐性的影响。