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小黑杨WRKY56转录因子参与蛋白质间相互作用研究

项目名称:小黑杨WRKY56转录因子参与蛋白质间相互作用研究

项目级别:省院所基本应用技术研究专项

起止时间:2018.01-2019.12

参加人员:邢岩等

项目介绍:本研究以东北地区广泛种植的小黑杨 (Populus simonii × P. nigra) (小黑14)为植物材料,在获得小黑杨WRKY56 (PsnWRKY56) 转录因子基因全长cDNA序列的基础上开展下列工作:(1) 小黑杨WRKY56转录因子互作蛋白的筛选与验证为研究PsnWRKY56转录因子与其他蛋白质间的相互作用,利用GAL4为基础的酵母双杂交法筛选与PsnWRKY56转录因子发生互作的蛋白。对筛选获得的互作蛋白进行二次筛选和验证,对目的蛋白进行生物信息学分析。 (2) 小黑杨WRKY56转录因子与互作蛋白基因表达分析利用Real-time PCR方法对PsnWRKY56转录因子基因和互作蛋白基因,在盐碱、干旱、低温条件下转录水平的表达情况进行分析。(3) 小黑杨WRKY56转录因子磷酸化位点突变对蛋白互作影响的研究对WRKY转录因子磷酸化位点进行突变,使Ser/Thr突变为Ala,确定该突变是否会影响PsnWRKY56转录因子与蛋白质相互作用。