色氨酸工程生产菌的构建

       本项目通过NCBI查询aroG和trpBA序列，设计引物，从JM109中成功克隆出aroG和trpBA片段，构建了表达载体pET-32a-aroG和pET-30a-trpBA；将表达载体转化至YYS-T16中，经琼脂糖凝胶电泳检测、DNA测序、SDS-PAGE电泳检测，获得了1株可大量表达DAHP合成酶和色氨酸合成酶的菌株，与出发菌株比较，酶活分别为出发菌株的3.6倍和2.8倍。对摇瓶发酵培养基以及发酵培养条件进行了研究，对比不同的碳源、氮源等营养成分对菌株产L-色氨酸的影响，确定了葡萄糖、玉米浆干粉、硫酸铵、硫酸镁、磷酸盐为培养基的主要成分；通过正交试验研究，确定了产酸培养基的成分，经发酵培养72小时，L-色氨酸的累积量可达11.32g/L。

       联系人：黑龙江省科学院微生物研究所张先成

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